Item – Theses Canada

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OCLC number
1007028529
Author
Bisson, Julie,1972-
Title
Essais de purification et séquençage de la glycoprotéine GP39.
Degree
Thèse (M. Sc.)--Université de Sherbrooke, 1997.
Publisher
Ottawa : National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, [1998]
Description
2 microfiches.
Notes
Comprend des réf. bibliogr.
Abstract
La glycoproteine GP39 est localisee dans les granules de secretion des cellules indifferenciees des glandes gastriques, des cryptes intestinales et coliques, et des cellules epitheliales des glandes associees au tractus digestif: glandes salivaires, vesicules biliaire et pancreas. De plus, on la trouve dans plusieurs glandes exocrines, dont les secretions viennent en contact avec le milieu exterieur: glandes lacrymales, glandes sudoripares. A cause de cette distribution, nous avons emis l'hypothese que la GP39 pourrait jouer un role dans la protection contre les bacteries. L'objectif de ce travail etait de purifier cette glycoproteine afin d'en faire le sequencage. Plusieurs approches de purification ont ete effectuees: immunoprecipitation, chromatographie d'affinite, divers gradients, electro-elution, et criblage d'une librairie d'expression. La sequence des douze premiers acides amines de la parti NH$\sb2$ terminale a ete determinee. Cette sequence, QELEELNVPGEL, est homologue a 100% avec les premiers acides amines de la beta-caseine bovine. Par contre nous savons que la GP39 n'est pas une caseine puisqu'elle a un poids moleculaire de 350 kDa tandis que la beta-caseine a un poids de 25 kDa. Cinq clone positifs ont ensuite ete obtenus suite au criblage d'une librairie d'expression d'ADNc d'intestin grele humain 5$\sp\prime$STRETCH PLUS. Les ADNc intestinaux de trois de ces cinq clones ont ete amplifies par PCR. Ces trois ADNc seront eventuellement clones dans le vecteur pBluescript$\sp\circler$ II KS pour en faire le sequencage. Les sequences obtenus seront comparees a l'aide d'une banque de genes pour determiner s'ils correspondent a des genes nouveaux ou a des genes deja connus.
ISBN
0612265439
9780612265431